关于引物的退火温度?为什么用公式计算的引物退火温度和试剂公司送来的合成报告单上的退火温度不一致?

关于引物的退火温度?为什么用公式计算的引物退火温度和试剂公司送来的合成报告单上的退火温度不一致? 关于退火温度与引物Tm~我用PP5做的引物发现引物Tm值比退火温度低 这很奇怪啊,做PCR是不是退火温度一定要比Tm高呢? 我设计了引物,结果生物公司合成的引物退火温度比我设计的低10度,为什么,我用哪个退火温度 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? ISSR-PCR引物的退火温度问题我做ISSR-PCR引物的退火温度能不能直接使用primer5.0这个软件计算得出的退火温度.理论上来说这是最佳的退火温度吗? 为什么生物公司合成的引物退火温度比设计的温度要低10度,我用哪个! pcr引物退火温度55度时不行,58度可以,为什么在做PCR时,引物用55度的退火温度扩不出来,而用58度却扩出来了,为什么 为什么设计出来的引物退火温度过高?我使用的是oligo软件 引物退火温度是53度,如何设置两个梯度的退火温度 一些通用引物的退火温度?比如m13 如何进行引物退火温度的梯度设置 退火温度与引物的TM值有什么联系?为什么退火温度要比TM低5度左右最合适? 引物的退火温度如何计算,用tm值减去5度,靠谱不?用1m na+的还是50mmna+? 退火的温度选择决定于引物的碱基序列?A 引物序列越长 退火温度越低B 引物序列越短 退火温度越低C 引物中C G 含量越高 退火温度越高D 引物中A T 含量越低 退火温度越低选择是A退火就是复性 用相同的引物做PCR和qPCR的退火温度是一样的吗?我看文献里的,好像不一样,为什么? 金属退火温度是怎么计算的 ISSR－PCR退火温度如何设定有些引物说明书上的Tm值只有30～40度,通过公式2（A＋T）＋4（G＋C）－2计算的温度也只有30多度,我该如何设定退火温度? 用primer 5.0 设计引物的时候,哪个才是真正的PCR产物退火温度Tm,看哪个?