作业帮凯氏定氮仪可以测蛋白质含量吗?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/04 14:19:17
凯氏定氮仪可以测蛋白质含量吗?
凯氏定氮仪可以测蛋白质含量吗?
凯氏定氮仪可以测蛋白质含量吗?
可以.凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法.即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收,再以标准碱滴定,就可计算出样品中的氮量.由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法.
凯氏定氮法首先将含氮有机物与浓硫酸共热,经一系列的分解、碳化和氧化还原反应等复杂过程,最后有机氮转变为无机氮硫酸铵,这一过程称为有机物的消化.为了加速和完全有机物质的分解,缩短消化时间,在消化时通常加入硫酸钾、硫酸铜、氧化汞、过氧化氢等试剂,加入硫酸钾可以提高消化液的沸点而加快有机物分解,除硫酸钾外,也可以加入硫酸钠、氯化钾等盐类类提高沸点,但效果不如硫酸钾.硫酸铜起催化剂的作用.凯氏定氮法中可用的催化剂种类很多,除硫酸铜外,还有氧化汞、汞、硒粉、钼酸钠等,但考虑到效果、价格及环境污染等多种因素,应用最广泛的是硫酸铜.使用时常加入少量过氧化氢、次氯酸钾等作为氧化剂以加速有机物氧化.消化完成后,将消化液转入凯氏定氮仪反应室,加入过量的浓氢氧化钠,将NH4+转变成NH3,通过蒸馏把NH3驱入过量的硼酸溶液接受瓶内,硼酸接受氨后,形成四硼酸铵,然后用标准盐酸滴定,直到硼酸溶液恢复原来的氢离子浓度.滴定消耗的标准盐酸摩尔数即为NH3的摩尔数,通过计算即可得出总氮量.在滴定过程中,滴定终点采用甲基红-次甲基蓝混合指示剂颜色变化来判定.测定出的含氮量是样品的总氮量,其中包括有机氮和无机氮.
蛋白质是含氮的有机化合物，蛋白质的含氮量一般为16%，因此可以用测定蛋白质中氮含量的方法计算蛋白质含量或浓度。在凯氏定氮仪中，将蛋白质与硫酸和催化剂一同加热，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。
蛋白质（%）=总氮量（%）×K
式中K为换算因数，因蛋白质的类型不同稍有差...
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蛋白质是含氮的有机化合物，蛋白质的含氮量一般为16%，因此可以用测定蛋白质中氮含量的方法计算蛋白质含量或浓度。在凯氏定氮仪中，将蛋白质与硫酸和催化剂一同加热，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。
蛋白质（%）=总氮量（%）×K
式中K为换算因数，因蛋白质的类型不同稍有差别，一般为6.25，即100/16。
当蛋白质样品中混合了其他含氮量高的杂质（如三聚氰胺）时，该方法可产生较大误差，需要采用其他方法，例如双缩脲法、考马斯亮蓝G250法等。
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可以，要经过消解，就是你要做好通风措施。。。因为氨气味道很大。如果是玻璃仪器做，要洗干净。。。。见过师兄洗了一早上，还没洗干净的。。。仪器做的话，挺快的，就是我们那时用的氢氧化钠蛮浓的，催化剂那时好像是硫酸铜什么的，消煮液好像是过氧化氢、浓硫酸混合物。总之这实验，要小心点。。。。。...
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可以，要经过消解，就是你要做好通风措施。。。因为氨气味道很大。如果是玻璃仪器做，要洗干净。。。。见过师兄洗了一早上，还没洗干净的。。。仪器做的话，挺快的，就是我们那时用的氢氧化钠蛮浓的，催化剂那时好像是硫酸铜什么的，消煮液好像是过氧化氢、浓硫酸混合物。总之这实验，要小心点。。。。。
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