最近在做转化实验,转化到大肠杆菌里面,请问一下什么是假阳性啊是不是指载体没有与目的基因连接,就直接进行转化,如果是这样,在进行“蓝白斑”筛选时,原理是当外源片段插入到载体质粒

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/09 12:28:44
最近在做转化实验,转化到大肠杆菌里面,请问一下什么是假阳性啊是不是指载体没有与目的基因连接,就直接进行转化,如果是这样,在进行“蓝白斑”筛选时,原理是当外源片段插入到载体质粒

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最近在做转化实验,转化到大肠杆菌里面,请问一下什么是假阳性啊
是不是指载体没有与目的基因连接,就直接进行转化,如果是这样,在进行“蓝白斑”筛选时,原理是当外源片段插入到载体质粒的多克隆位点上会导致读码框的改变,表达蛋白失活,含有重组质粒的转化子在声色培养基上只能形成白色菌落.如果载体没有与目的基因连接,就直接进行转化,能形成白色菌落吗?最近在做这方面的实验,不懂,

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转化的大肠杆菌是培养于含有X-gal和某种抗生素(如果载体是pBR322,是氨苄青霉素)的培养基中的.由于载体上带有lac Z',在IPTG的诱导下,能产生半乳糖苷酶的一条肽链,而菌体本身能产生半乳糖苷酶的另一条肽链,所以两者组成了具有功能的半乳糖苷酶.半乳糖苷酶催化X-gal形成蓝色产物.
菌体内转入重组质粒,载体与目的基因相连,破坏了lac Z' --->白色菌落(阳性)
菌体内转入空载体,载体上的lac Z'完整--->蓝色菌落(阴性)
菌体内本身由于突变等原因具有抗氨苄青霉素能力,但未转入载体--->白色菌落(假阳性)

最近在做转化实验,转化到大肠杆菌里面,请问一下什么是假阳性啊是不是指载体没有与目的基因连接,就直接进行转化,如果是这样,在进行“蓝白斑”筛选时,原理是当外源片段插入到载体质粒 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化实验:在转化实验中,涂平板前需要在37度下振荡培养30-60min大肠杆菌感受态细胞的制备与转化实验:在转化实验中,涂平板前需要在37度下振荡培养30-60min,请 大肠杆菌感受态细胞转化实验中冰浴的作用是什么? 关于肺炎双球菌转化实验~请判断“肺炎双球菌体内转化实验以体外转化实验做基础”对还是错?为什么,“做基础”的意思谁先谁后? 姐姐在做电解食盐水实验,能量转化由电能转化为___________能 哪些因素影响转录体系的转化率用大肠杆菌做转化表达的时候 质粒转化大肠杆菌的目的? 关于酵母双杂交SYSTEM3的AH109菌株想问有人用clontech的酵母双杂交system 3进行共转化实验吗?是共转化入AH109吗?转化效率怎么样?我最近在做共转化时AH109培养的非常不好,长得非常小想问有 为什么大肠杆菌感受态细胞制备和转化转化实验为什么要先用液态的LB后用固态的培养基呢? 用氯化钙法将质粒DNA转化入大肠杆菌实验中,转化成功的关键因素有哪些? 在用表达载体转化大肠杆菌时,常用什么处理大肠杆菌? 设计一个实验流程,把下面的目标基因重组转化到大肠杆菌中进行表达要求包括:质粒DNA抽提,限制性内切酶酶切,目的DNA片段分离、纯化,载体构建,重组DNA转化等主要步骤 用氯化钙法将质粒DNA转入大肠杆菌实验中,转化成功的关键有哪些? 在质粒转化大肠杆菌的实验中,在热激以后为什么要先进行培养1小时,这时的培养基中为什么不加入抗生素? 大肠杆菌里面有质粒吗?如果大肠杆菌有质粒的话,那做转化的感受态细胞里有没有质粒啊?如果有质粒是不是也有抗性基因?那蓝白筛选还有意义吗? 在噬菌体侵染实验中,先用同位素p32标记大肠杆菌,在噬菌体侵染大肠杆菌时,为什么噬菌体的子代会出现p32标记的dna,噬菌体的dna是怎么转化为p32标记的dna的? 大肠杆菌感受态转化的原理是什么? 转化大肠杆菌平板出现卫星菌落是怎么回事