20微升pcr反应体系各种反应物分别应该加多少

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/04/29 21:09:09

20微升pcr反应体系各种反应物分别应该加多少
20微升pcr反应体系各种反应物分别应该加多少

20微升pcr反应体系各种反应物分别应该加多少
10×扩增缓冲液 2ul,4种dNTP混合物各200umol/L 2ul,引物各10～100pmol 0.5ul,模板DNA 0.2ug,Taq DNA聚合酶0.2ul,Mg2+1.5mmol/L 1.5ul,加双或三蒸水至20ul.

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10Xbuffer: 2ul;（含镁离子，如不含的话另外加MgCl2到终浓度10-20mM ）
2.5mM dNTP: 0.6ul(我喜欢用的，公司一般都默认推荐用0.2uM，也就是1.6ul，个人感觉太多)
10uM Primer：0.4 ul（这是一对混合在一起的，也可以分开加）
10u/ul Taq ：0.2 ul
Template：菌液1ul（我是跑菌落PCR，要按照你的模板浓度来加，一般质粒5-30ng就足够，genome 要100ng以上）
ddH2O: 15.8ul (补足20ul)
不过第一次做还是建议你按所买酶上的说明书来做，做不出来，还可以找他们，呵呵

收起

最好根据Taq酶的说明书做

20微升pcr反应体系各种反应物分别应该加多少 pcr反应体系中引物浓度20uM指的是什么,还有20微升体系怎么换算成50微升体系呢, pcr 25微升体系的各种组分具体是怎么加的? PCR反应体系中dNTP的浓度怎么算?我的反应总体积20微升,其中加1.0微升dNTP,装有dNTP管上写的10mM,1mL. 酶切反应体系中是10微升的好还是20微升的好? PCR产物的电泳条带不够亮,为何?如何优化PCR反应体系我用的25微升的反应体系 PCR扩增时,25微升体系一般加引物多少? PCR反应体系是什么? PCR反应体系是什么 PCR 怎样稀释做50微升体系的PCR使用的引物浓度是多少?怎样稀释? 什么是25微升PCR反应体系?是不是还有其他体系呢,我不太懂这个,只是用到了而已,这个体系有什么意义,怎样选择呢,希望哪位朋友前前后后给我将明白一点, pcr反应体系如何选择什么是PCR-RFLP反应体系 pcr技术的反应体系? 25微升PCR体系中,两种引物分别加0.5微升,那么所添加的引物的浓度是多少?几摩尔每升?不问终浓度,问的是加入体系之前那0.5微升的引物其浓度几何? 怎么判断PCR用哪个反应体系 pcr反应体系包括哪几个组分 PCR反应体系的主要成分包括什么?